大鼠AMPA离子能谷氨酸受体1 （ELISA）试剂盒

大鼠AMPA离子能谷氨酸受体1 （ELISA）试剂盒

预防措施

ELISA试剂盒检测时的注意事项

1. ELISA 实验的一般规则

1、为保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平测定。但最好请专业人士纠正。

2、可配20ul、50ul、100ul、1000ul各一支枪。吸出不同的液体后，更换移液器吸头。即使在吸气标准时。

3. 实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，让所有试剂回到室温，使结果更稳定。

4. 实验过程中，基板应避光。

5、用枪吸液体时，速度不能太快，以免产生气泡，吸不准。

6、吸液时，请使用范围接近所需量的枪，以减少误差。

7、在酶标孔中加入液体时，避免吸头与孔内液体接触，使吸头上的液滴与孔壁接触，液滴自然流下。

8. 加完所有液体后，平行轻轻摇动桌面上的ELISA板30秒，使液体混合。也可以使用酶标仪的摇动功能。

9. 温水浴时，用不干胶或胶带纸将ELISA板密封，防止水分蒸发。

10、洗板时，每次加入洗剂后，应静置1分钟，使清洗更*。如果没有洗板机，请在除去液体后在报纸或羊毛纸上将盘子拍干。

11、当洗液不够时，可用蒸馏水配制PH7.4，0.02M磷酸盐缓冲液，加入0.1% Tween 20作为洗液。加入1/1000的后可长期保存。

12、基材对光敏感，使用前应立即准备。

13、检测前，打开酶标仪，使其稳定10分钟以上。

14、底物有一定毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免。

15、待测样品应澄清，否则会影响结果。

16、温水浴时间应符合试剂盒规定。

17、尽量做双孔实验，以保证数据的准确性。

18、结果有问题的样品，应采用其他方法确认。

可以总结为四个方面：

1. 用于定位各种细胞内成分的免疫酶染色。

2.研究抗酶抗体的合成。

3. 出现少量免疫沉淀。

4、体液中抗原或抗体成分的定量检测。

二、下面所提到的是针对我公司的ELISA产品会出现的问题及解决办法

1. 加入反应终止液后，没有吸光值或吸光值偏低。

a.原因：未加入酶标记物。

解决办法：请按照操作步骤进行。

b.原因：试剂盒内容物未能充分回。

解决办法：确定试剂盒内容物回温后再进行操作。

c.原因：室温太低。

解决办法：若室温太低(<19℃)，请于操作步骤4，适当延长温育时间。

d.原因：未使用试剂盒的清洗液清洗。

解决办法： 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。

e.原因：试剂盒已过有效期限。

解决办法：请更换成仍在有效期限内的试剂盒。

2. 标准曲线线性不佳，或是平行性不好。

a.原因：温育位置避光不好或受到气流干扰。

解决办法： 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。

b.原因：操作时间拖太久。

解决办法：请在方法熟练后再进行操作。

c.原因：微孔间相互污染。

解决办法： 加样品时，请小心勿溅出微孔外，以免造成其它微孔的污染。

d.原因：标准品或酶标记物所加入的量不一致。

解决办法：请使用已校正过的移液枪，并确保其与吸头之间有高度密合性。

e.原因：添加样品或试剂的操作方法不正确。

解决办法：加样品或试剂时，吸头请勿接触微孔。

f.原因：洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。

解决办法：请随时监控洗板机洗板过程，洗完后立即进行下一步骤。

3. 吸光值均偏高(或线性不够陡)。

a.原因：室温太高(>25℃)。

解决办法： 若无法降低室内温度，请适当缩短步骤4的温育时间。

b.原因：底物溶液受到污染。

解决办法： 若发现底物溶液已呈现淡蓝色，请不要再使用。

c.原因：反应时间超过太久。

解决办法：请控制反应时间。

d.原因：酶标记物污染了盒内其它试剂。

解决办法：使用过的吸头应立即丢弃，可避免试剂间相互污染，凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡，再以清水冲洗干净，可确保无残留)

4. 阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值。

a.原因：微孔中的试剂未能充分混合。

解决办法： 试剂加完后，需轻敲盘四周使其充分混合均匀。

b.原因：洗板过程发生问题(同2-f.)。

解决办法：请参考2-f.

c.原因：添加样品或酶标记物的量不一致。

解决办法： 请参考2-d.

该IBL试剂盒可用于小鼠血清、EDTA血浆和细胞上清液中IL-6的定量检测

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