大鼠AKT蛋白ELISA试剂盒

       产品名称：大鼠AKT蛋白ELISA试剂盒

　　主要成分：酶标板，试剂，标准品等

　　产品规格：48T/96T

　　产品形状：盒装液体

　　保存条件：2-8℃

　　有效期：6个月

　　检测方法：酶联免疫吸附法

　　检测波长：450nm

　　研究领域：神经生物学，新陈代谢，免疫学，其它研究

　　运输：快递送货上门，运输保存条件苛刻产品可单独送货上门

　　大鼠AKT蛋白ELISA试剂盒预防措施ELISA试剂盒检测时的注意事项

　　ELISA实验的一般规则

　　1、为保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平测定。但最好请专业人士纠正。

　　2、可配20ul、50ul、100ul、1000ul各一支枪。吸出不同的液体后，更换移液器吸头。即使在吸气标准时。

　　3、实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，让所有试剂回到室温，使结果更稳定。

　　4、实验过程中，基板应避光。

　　5、用枪吸液体时，速度不能太快，以免产生气泡，吸不准。

　　6、吸液时，请使用范围接近所需量的枪，以减少误差。

　　7、在酶标孔中加入液体时，避免吸头与孔内液体接触，使吸头上的液滴与孔壁接触，液滴自然流下。

　　8.加完所有液体后，平行轻轻摇动桌面上的ELISA板30秒，使液体混合。也可以使用酶标仪的摇动功能。

　　9.温水浴时，用不干胶或胶带纸将ELISA板密封，防止水分蒸发。

　　10、洗板时，每次加入洗剂后，应静置1分钟，使清洗更*。如果没有洗板机，请在除去液体后在报纸或羊毛纸上将盘子拍干。

　　11、当洗液不够时，可用蒸馏水配制PH7.4，0.02M磷酸盐缓冲液，加入0.1%Tween20作为洗液。加入1/1000的后可长期保存。

　　12、基材对光敏感，使用前应立即准备。

　　13、检测前，打开酶标仪，使其稳定10分钟以上。

　　14、底物有一定毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免。

　　15、待测样品应澄清，否则会影响结果。

　　16、温水浴时间应符合试剂盒规定。

　　17、尽量做双孔实验，以保证数据的准确性。

　　18、结果有问题的样品，应采用其他方法确认。

　　可以总结为四个方面：

　　1、用于定位各种细胞内成分的免疫酶染色。

　　2、研究抗酶抗体的合成。

　　3、出现少量免疫沉淀。

　　4、体液中抗原或抗体成分的定量检测。

　　利用

　　ELISA的基础是抗原或抗体的固定化和抗原或抗体的酶标记。固相载体表面结合的抗原或抗体仍保留其免疫活性，而酶标抗原或抗体同时保留其免疫活性和酶活性。在测量过程中，测试样品（其中的抗体或抗原）与固体支持物表面的抗原或抗体发生反应。在固相载体上形成的抗原抗体复合物通过洗涤与液体中的其他物质分离。然后加入酶标抗原或抗体，也通过反应与固相载体结合。此时，固相上酶的量与样品中被测物质的量成正比。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成有色产物，产物的多少与样品中被测物质的多少直接相关，因此可以进行定性或定量分析根据颜色深度。由于酶的高催化效率，间接放大了免疫反应的结果，并且该测定方法达到了高灵敏度。ELISA可用于测量抗原和抗体。

　　组成结构

　　1.血清：手术过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。采血后，以1000xg离心10分钟，快速小心地分离红细胞。

　　2、血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。通过以1000xg离心30分钟去除颗粒。

　　3.细胞上清：1000×g离心10分钟，去除颗粒和聚集物。

　　4、组织匀浆：加入适量生理盐水打碎组织。以1000×g离心10分钟并去除上清液。

　　5.储存：如果样品不立即使用，应在-70℃下分小份储存，避免反复冷冻。尽量不要使用溶血或高脂血症。如果血清中含有大量颗粒，请在测试前将其离心或过滤。不要在37°C或更高的温度下解冻。在室温下解冻并确保样品均匀*地解冻。

　　该IBL试剂盒可用于小鼠血清、EDTA血浆和细胞上清液中IL-6的定量检测

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