大鼠CD34分子 （ELISA）试剂盒

大鼠CD34分子  （ELISA）试剂盒

利用

ELISA 的基础是抗原或抗体的固定化和抗原或抗体的酶标记。固相载体表面结合的抗原或抗体仍保留其免疫活性，而酶标抗原或抗体同时保留其免疫活性和酶活性。在测量过程中，测试样品（其中的抗体或抗原）与固体支持物表面的抗原或抗体发生反应。在固相载体上形成的抗原抗体复合物通过洗涤与液体中的其他物质分离。然后添加酶标记的抗原或抗体，并在整个反应过程中与固体支持物结合。此时，固相上的酶量与样品中分析物的量成正比。加入酶促反应的底物后，底物被酶的有色产物催化，产物的多少与样品中分析物的量直接相关，可进行定性或定量分析。关于颜色深度。由于酶的高催化效率，间接放大了免疫反应的结果，并且该测定达到了高灵敏度。 ELISA可用于测量抗原和抗体。

Elisa生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗体ELISA检测。

中文名ELISA 试剂盒

外文名ELISA Kit

问世时间60-70年代

特点试剂稳定、易保存、操作简便

ELISA试剂盒在国内有许多种叫法，例如：ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等，比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。

ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来，得到科研工作者的认可及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化领域的长足发展。

操作方法

双抗体夹心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。

2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

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